Определение лактопероксидазы (ЛП) в сыром молоке
Традиционные методы определения лактопероксидазы (ЛП) сложны и требуют много времени, поэтому для быстрого и удобного определения ЛП в сыром молоке была разработана тест-полоска, основанная на принципе ферментативной реакции.
Лактопероксидаза является представителем пероксидаз, группы природных ферментов, и состоит из одной полипептидной цепи, содержащей 612 аминокислотных остатков. Его молекулярная масса составляет около 78 кДа. ЛП широко распространен в молочных, слюнных и слезных железах и их секретах.
Было описано много методов обнаружения ЛП, в основном основанных на цветных реакциях. Кумар и Бхатия (1999) использовали 2,2'-азинобис-(3-этил бензтиазолин-6-сульфоновую кислоту) (ABTS) в качестве хромогенного субстрата для стандартизации спектрофотометрического метода измерения активности ЛП в молоке. ABTS и гваякол использовались в качестве субстратов для обнаружения для изучения влияния обработки высоким давлением на денатурацию ЛП. Fonteh et al. (2005) подтвердили, что на активность ЛП влияют различные соединения, присутствующие в реакционной системе ABTS. 3,3', 5,5'-Тетраметилбензидин (ТМБ) использовался для обнаружения активности ЛП в человеческом молоке. В этих методах обнаружения ЛП образцы молока должны быть предварительно обработаны, процедуры обнаружения сложны, требуется высокая квалификация лаборантов и сложное оборудование. Поэтому разработка быстрого и удобного метода обнаружения ЛП с высокой чувствительностью и точностью имеет большое теоретическое и практическое значение для сбора сырого молока и онлайн переработки молочных продуктов, содержащих ЛП.
Как правильно содержать телят, чтобы не допустить развития инфекций?
Ротавирус A (RVA) и коронавирус крупного рогатого скота (CoV) — два основных вирусных энтеропатогена, связанных с диареей новорожденных телят, и они широко распространены по всему миру. Они являются хорошо распознаваемыми этиологическими агентами синдрома диареи новорожденных телят наряду с другими патогенами. Факторы риска, связанные с окружающей средой и методами управления, могут оказывать непосредственное влияние на заболеваемость и эпидемиологию этих вирусных диарей. Одним из таких факторов является система содержания телят. По данным перекрестных исследований, системы индивидуального содержания сводят к минимуму заражение энтеральными патогенами и снижают риск диареи.
Целью исследования было определить влияние индивидуальных или групповых систем содержания телят на эпидемиологию RVA и CoV у телят с молочных ферм посредством продольного исследования.
Проведённая работа показала следующее. Доля телят, зараженных хотя бы один раз RVA и CoV, составила 63,3% (7/11) и 100% (9/9) в FA и FB, соответственно. Всего было собрано 160 проб фекалий от 20 телят. Доля проб, положительных на RVA и CoV, выше в FB (23,6%), чем в FA (9%) для обоих антигенов, и эта разница статистически значима. Только один теленок из ФА коинфицирован обоими вирусами (теленок № 11, на 35-й день).
У телят из FA (индивидуальное содержание) линька RVA была зарегистрирована между 21 и 42 днями жизни, в то время как линька CoV была обнаружена только у двух телят на 2 и 35 день, соответственно. У телят из FB (групповое содержание) антигены RVA и CoV были обнаружены в основном в первые 2 недели жизни. Индивидуальное содержание было протекторным фактором для заражения RVA у телят менее 2 недель жизни в FA, в то время как телята менее 2 недель жизни из FB показали более высокий риск заражения RVA, чем более старые животные в этой ферме.
Доля образцов с диареей существенно не отличалась между фермами (FA 18/88; FB 11/72). В FA 63% (7/11) и FB 77% (7/9) телят имели по крайней мере один эпизод диареи, с 2,5 и 1,3 случаями диареи в день, соответственно. В FA на 7 день жизни распространенность телят с диареей достигла максимума, и в целом она оставалась постоянной до конца исследования. В FB, начиная с первых дней жизни (день 0), было обнаружено больных телят с максимальной распространенностью на 7 и 21 день жизни, где она начинает снижаться до конца исследования.
Что касается временных рамок выделения вирусов в данном исследовании, то RVA и CoV наблюдались в период с 3 по 6 неделю жизни у животных, содержавшихся в индивидуальных помещениях, и в первые 2 недели жизни у животных, содержавшихся в групповых помещениях. Эти результаты согласуются с результатами исследования Heckert et al., в котором телята, содержавшиеся в домиках или на привязи, демонстрировали выделение CoV из фекалий и дыхательных путей, начиная с 4 недели жизни.
Поскольку это было обсервационное исследование, не было контроля ни одной из переменных, которые могли бы повлиять на результат. Тенденции в отношении вирусной инфекции и диареи, обнаруженные в ходе исследования, вероятно, были бы более очевидными (статистически значимыми) при сравнении обеих систем выращивания, если бы в исследовании участвовало большее количество телят и за ними следили ежедневно, а не еженедельно. Несмотря на то, что целью исследования было изучение RVA и CoV, было бы полезно исследовать другие патогены, участвующие в микробиологии диареи новорожденных телят.